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Convibra Conference - ADAPTAÇÃO DE PROTOCOLO DE RT-PCR PARA ANÁLISES DE VÍRUS DO GÊNERO POTEXVIRUS
ADAPTAÇÃO DE PROTOCOLO DE RT-PCR PARA ANÁLISES DE VÍRUS DO GÊNERO POTEXVIRUS

DOCUMENTAÇÃO

Tema: Biotecnologia

Temas Correlatos: Microbiologia;

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AUTORIA

Martha Maria Passador , Roberta Pierry Uzzo , Julio Massaharu Marubayashi , Valdir Atsushi Yuki , Christina Dudienas

ABSTRACT
Para complementar a eficiência das análises fitopatológicas em Quarentenário, é viável o uso de protocolos adequados que apresentem precisão e especificidade. Dentro deste contexto, o presente estudo teve como objetivo, adaptar um protocolo de PCR precedida pela transcrição reversa (RT-PCR) de modo a estabelecer um método padrão em uma única etapa para diagnose de virus pertencentes ao gênero Potexvirus. A detecção do produto de PCR foi realizada em eletroforese em gel de agarose, e foi possível verificar a amplificação do fragmento alvo, porém com anelamentos inespecíficos. Desta forma, para aprimorar a técnica, amostras foram submetidas à reação de RT-PCR com gradiente de temperatura de anelamento, o que possibilitou estabelecer as condições apropriadas para o ciclo da reação.  Os produtos purificados da reação de RT-PCR foram submetidos a sequenciamento para confirmação dos isolados analisados. A metodologia proposta no presente estudo, permitiu confirmar a presença de duas espécies do gênero Potexvirus em reação de RT-PCR em uma única etapa. 

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